1、田间选株:选择含有典型的本品种特性、符合脱毒品种要求的马铃薯,一般情况下植株健壮且有明显病毒性的品种都可以进行脱毒。
2、脱毒材料表面消毒:先用酒精给马铃薯消毒,然后用漂白粉浸泡,再用无菌水清洗几次,最后封于无菌瓶中。
3、拨取茎尖组织:用镊子固定茎尖,在显微镜下进行组织剥离,切取的茎尖带有1-2个叶原基即可。
一、马铃薯茎尖脱毒的操作方法
1、田间株选
(1)选择的植株一定要表现出典型的本品种特性,符合脱毒品种的要求,包含株型、叶形、花色等植物学性状及成熟期等农艺性状。
(2)通常植株生长健壮,有明显病毒性,比如真菌性、细菌性病害的症状,单株产量和大薯率高的品种都可以进行脱毒。
(3)收获后一定要再对薯块细选,选择范围包含皮色、肉色、薯形、芽眼等,通常无病斑、虫蛀和机械创伤的大薯可以作为脱毒材料。
2、脱毒材料表面消毒
(1)先将马铃薯的芽在75%的酒精中过一遍(几秒钟),然后用饱和漂白粉上清液或用次氯酸钠溶液稀释为5%-7%,浸泡15-20分钟。
(2)然后用无菌水清洗3-4次,消毒完的材料一定要置于封口的无菌瓶中。
3、拨取茎尖组织
(1)取经过处理的茎尖,以无菌镊子进行固定,在30-40倍解剖镜下进行分生组织剥离。
(2)用解剖刀小心的除去茎尖周围的叶片组织,暴露出顶端圆滑的生长点,然后用解剖针细心切取所需的茎尖分生组织。
(3)一般切取茎尖的长度为0.1-0.3mm,带有1-2个叶原基即可。
(4)将剥离的茎尖置于马铃薯茎尖分生组织培养的培养基中进行培养即可。
二、脱毒马铃薯的种植管理方法
1、原种繁殖
原种繁殖材料为脱毒微型薯(原种)。
(1)土壤要求:选择海拔1600-2200米(早熟种应选择海拔1600-1900米)水源条件好,中上等肥力,土壤疏松、平缓地,土细,无石块、无杂草,前作为玉米、荞、麦。
(2)微型薯必须经过催芽(待芽长出0.2-0.4厘米)才可以播种。
(3)种植密度:早熟种株行距30×55厘米,4042塘/米。
(4)底肥:每亩钾15公斤,一次施入,播种后浇足塘水后,盖细土2-3厘米。
(5)田间管理:苗齐后浇一次透水,待苗长到12厘米左右除草一次,现蕾期(打花苞前5天)除草保窝。现蕾期至叶片枯黄前20天,每隔15天用防蚜虫药剂防治一次。发现杂株、病株及时。
(6)适时收获:选择晴天收种薯,否则,易烂薯。
2、一级种、二级种繁殖
一级种采用原种作繁殖材料,二级种采用一级种作繁殖材料。
(1)土壤选择:一、二、级种均可在该品种适宜区繁殖,选择交通方便,平缓疏松沙壤,中上等肥力条件。前作为玉米、荞、麦,保证种薯纯度。
(2)切种薯方式:采用无油腻、盐的刀子,以种薯顶部纵切,打破顶芽,然后,根据芽眼分布情况,每块留1-2个芽,伤口晾干后即可播种。
(3)种植密度:早熟种株行距30×55厘米,4042塘/亩。中、晚熟种株行距30×58厘米,3833塘/亩。
(4)底肥:每亩腐熟农家肥1500公斤,普钙50公斤,尿素20公斤,硫酸钾15公斤,一次性施入,播种后,干旱地块,浇足塘水,盖塘土5厘米。
(5)田间管理:苗齐后进行次除草,现蕾期进行第二次除草保窝,保障单沟或畅通排水。现蕾期至叶枯黄,每隔15天防治一次蚜虫。发现病株、杂株及时,适时收获。
3、包装、贮藏
(1)原种、一级种、二级种田间收获时,统一包装,统一标签。
(2)每袋内外标签各一份,写明种薯名称、级别、验收人、收种时间。及时运输,集中或分户保管,发现烂薯,及时,专人负责,以防品种混杂。
(3)脱毒马铃薯切块催芽技术脱每马铃薯原种、一级种、二级种薯块较大,为了利用好每一个脱毒种薯,每亩保证150公斤种薯种植达到3800塘以上。